液相色谱系统中气泡对检测的影响及其解决要领
在我们举行液相色谱剖析时,有时会遇到这样一个问题:液相色谱仪系统的流路中保存气泡。
由于液相色谱仪气泡的保存,会造成色谱图上泛起尖锐的噪声峰,严重时会造身剖析迅速度下降;气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳固,使基线升沉。
造成上述征象的主要缘故原由有三条:一是流动相溶液中往往因消融有氧气或混入了空气而形成气泡;二是系统最先事情时未能将流路中的空气驱赶清洁;三是在注入样品时不注重混入了空气。
为了阻止这类问题的泛起,液相色谱剖析现实历程中必需重视对流动相举行脱气处置惩罚。
常用的脱气要领有以下几种:
1. 吹氦脱气法 使用在液体中比空气消融度低的氦气,在0.1Mpa压力下,以约60ml/min流速通入流动相10-15min以驱除消融的气体。此法使用于所有的溶剂,脱气效果较好,但在海内因氦气价钱较贵,本法使用较少;
2. 加热回流法 此法的脱气效果较好;
3. 抽真空脱气法 此时可使用微型真空泵,降压至0.05-0.07MPa即可除区消融的气体。显然使用水泵毗连抽滤瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成过滤机械杂质和脱气的双重使命。由于抽真空会引起混淆溶剂组成的转变,故此法适用于简单溶剂系统脱气。对多元溶剂系统应预先脱气后再举行混淆,以包管混淆后的比例稳固。
4. 超声波脱气法 它是现在实验室使用最普遍的脱气要领,将配制好的流动相连同容器一起放入超声波水漕中脱气10-20min即可。该要领操作轻盈,基本能知足一样平常剖析的要求。
5. 在线真空脱气法 把真空脱气装置串联到储液系统中,并团结膜过滤器,实现了流动相在进入输液泵前的一连真空脱气。此法的脱气效果显着优于上述几种要领,并适用于多元溶剂系统。
其二,在液相色谱仪系统最先事情前,可以用注射器毗连恒流泵的排空阀,抽入流动相,将流路中的空气驱赶清洁。
其三,在注入样品前注重倾轧样品注射器中的空气。